Bi8250c Vývojová a srovnávací imunologie – cvičení

Přírodovědecká fakulta
jaro 2015
Rozsah
0/2/0. 2 kr. (plus ukončení). Ukončení: z.
Vyučující
doc. RNDr. Pavel Hyršl, Ph.D. (cvičící)
Mgr. Pavel Dobeš, Ph.D. (cvičící)
Mgr. Libor Vojtek, Ph.D. (cvičící)
Mgr. Jakub Berka (cvičící)
Garance
doc. RNDr. Pavel Hyršl, Ph.D.
Ústav experimentální biologie – Biologická sekce – Přírodovědecká fakulta
Kontaktní osoba: doc. RNDr. Pavel Hyršl, Ph.D.
Dodavatelské pracoviště: Ústav experimentální biologie – Biologická sekce – Přírodovědecká fakulta
Předpoklady
Bi5220 Imunologie
Omezení zápisu do předmětu
Předmět je nabízen i studentům mimo mateřské obory.
Jiné omezení: Na předmět se vztahuje povinnost registrace, bez registrace může být znemožněn zápis předmětu!
Mateřské obory/plány
Cíle předmětu
Na konci tohoto kurzu bude student schopen: porozumět a vysvětlit na praktických příkladech rozdíly v imunitním systému hlavních skupin živočichů; porovnat imunitní systém bezobratlých a obratlovců.
Osnova
  • 1. Imunologie hmyzu – hemocyty, specifické barvení hemocytů G. mellonella akridinovou oranží (granulocyty), adherence plasmatocytů pomocí přidaných vápenatých iontů, hemocyty D. melanogaster značené RFP a GFP, cirkulující/sesilní hemocyty, fotodokumentace.
  • 2. Imunologie hmyzu – nodulace injikovaných bakterií a enkapsulace parazitů, koagulace hemolymfy, melanizace v místě poranění, fotodokumentace.
  • 3. Entomopatogenní hlístice hmyzu a jejich symbiotické bakterie, mikroskopie hlístic a bakterií značených GFP, průběh nákazy, bioluminiscence bakterií a kadaverů měřená luminometricky, fotodokumentace.
  • 4. Modelová nákaza hmyzu entomopatogenními hlísticemi – G. melonella a D. melanogaster, antimikrobiální aktivita měřená luminiscenčně.
  • 5. Entomopatogenní houby – Beauveria sp., nákaza hmyzích hostitelů, kultivace na živném médiu, mikroskopie.
  • 6. Genetika D. melanogaster – Actin Gal4 systém řízené exprese genů, křížení driver a responder line, mutantní linie BcImd, markery larev a dospělců Drosophily.
  • 7. + 8. RNAi linie Drosophily – experiment s cnockdown genů zapojených do imunity, důkaz zvýšené citlivosti na bakteriální nákazu.
  • 9. Imunita ryb – odběr krve, roztěry – mikroskopie, stanovení aktivity komplementu luminometricky s použitím E. coli, klasická a alternativní cesta, porovnání s jinými metodami – hemolýza erytrocytů, stanovení C3 složky komplementu.
  • 10. Imunita ptáků – odběr krve, oxidační vzplanutí luminometricky pomocí luminophoru Pholasin, důkaz nepřítomnosti MPO u ptačích heterofilů.
  • 11. + 12. Akryalmidová elektroforéza bílkovin hmyzí hemolymfy, rybí, ptačí a lidské plasmy – srovnání hlavních proteinových frakcí, barvení stříbrem.
Literatura
  • Comparative immunology. info
  • Turner R. J.: Immunology: A Comparative Approach, John Wiley & Sons Inc. 1994.
  • BECKAGE, N. E. Insect immunology. 1st ed. Amsterdam: Elsevier, 2008, 348 s. ISBN 9780123739766. info
  • CRUSE, Julius M. a Robert Edwin LEWIS. Illustrated dictionary of immunology. Boca Raton: CRC Press, 1994, 327 s.,6. ISBN 084934557X. info
Výukové metody
praktická cvičení, studenti se připravují ze studijních materiálů dostupných v IS
Metody hodnocení
Hodnocení je uděleno na základě splnění docházky (tolerance 2 omluvené neúčasti) a úspěšného napsání závěrečného testu. Hodnocení uděluje učitel, pro úspěšné zvládnutí testu student musí zodpovědět 50% požadovaných informací.
Informace učitele
Praktické cvičení doplňuje stejnojmennou přednášku, její absolvování ale není podmínkou účasti na cvičeních. Practical course is linked to the same name lecture, but can be passed independently.
Další komentáře
Studijní materiály
Předmět je vyučován každoročně.
Výuka probíhá každý týden.
Předmět je zařazen také v obdobích jaro 2016, jaro 2017, jaro 2018, jaro 2019, jaro 2020, jaro 2021, jaro 2022, jaro 2023, jaro 2024, jaro 2025.