B7722c Speciální metody analýzy mikroorganizmů II. -c

Přírodovědecká fakulta
podzim 1999
Rozsah
0/3/0. Ukončení: z.
Vyučující
doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc. (cvičící)
doc. RNDr. Alena Španová, CSc. (cvičící)
Garance
doc. RNDr. Alena Španová, CSc.
Ústav experimentální biologie – Biologická sekce – Přírodovědecká fakulta
Kontaktní osoba: doc. RNDr. Alena Španová, CSc.
Předpoklady
Cvičení je součástí předmětu B7722.
Omezení zápisu do předmětu
Předmět je nabízen i studentům mimo mateřské obory.
Mateřské obory/plány
Osnova
  • Studenti se v první části cvičení seznámí s prací s rekombinantní plasmidovou DNA. Druhá část cvičení je věnována DNA/DNA hybridisaci. Náplň jednotlivých cvičení je následující: Kultivace bakteriálních buněk nesoucích rekombinantní plasmid pUC19. Mikroizolace rekombinantní plasmidové DNA. Elektrotransformace rekombinantní a nerekombinantní plasmidové DNA do bakteriálních buněk E. coli JM109. Selekce transformantů. Chromatografická purifikace rekombinantní plasmidové DNA sondy. Značení plasmidové DNA sondy digoxigeninem pomocí nick translace. Příprava dot blotů s bakteriální DNA. Provedení DNA/DNA hybridizace. Detekce hybridních molekul DNA pomocí antidigoxigeninové protilátky.
Literatura
  • 1. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. (1989) Molecular Cloning. 2 ed., CSHL Press. 2. Darling D.C. and Brickell P.M. (1996) Nucleic Acid Blotting. IRL Press, Oxford.
Metody hodnocení
Cvičení je ukončeno zápočtem.
Další komentáře
Předmět je vyučován každoročně.
Výuka probíhá každý týden.
  • Statistika zápisu (nejnovější)
  • Permalink: https://is.muni.cz/predmet/sci/podzim1999/B7722c