Bi7990 Laboratorní praxe v laboratoři LMDM

Přírodovědecká fakulta
podzim 2023
Rozsah
3D. 1 kr. Ukončení: z.
Vyučující
Ing. Sylva Koudelková, Ph.D. (cvičící)
Mgr. Lucie Kuntová, Ph.D. (cvičící)
Mgr. Ivana Mašlaňová, Ph.D. (cvičící)
prof. RNDr. Roman Pantůček, Ph.D. (cvičící)
Mgr. Kristína Rovňáková (cvičící)
Garance
prof. RNDr. Roman Pantůček, Ph.D.
Ústav experimentální biologie – Biologická sekce – Přírodovědecká fakulta
Dodavatelské pracoviště: Ústav experimentální biologie – Biologická sekce – Přírodovědecká fakulta
Předpoklady
SOUHLAS
Omezení zápisu do předmětu
Předmět je nabízen i studentům mimo mateřské obory.
Mateřské obory/plány
předmět má 13 mateřských oborů, zobrazit
Cíle předmětu
Náplní kurzu bude seznámení se s provozem laboratoří LMDM, konkrétně se základními technikami a standartními protokoly, které jsou v laboratořích používány a s postupy dekontaminace a nakládáním s infekčním odpadem. Dále budou studenti zaškoleni a informováni o pravidlech obsluhy používaných přístrojů a také o pravidlech vydávání chemikálií, reagencií a spotřebního materiálu ze skladu. Po absolvování kurzu mohou začít bezpečně pracovat v laboratořích.
Osnova
  • 1) BOZP 2) Roztoky, principy zásobních roztoků, výpočty pracovních roztoků. Způsoby sterilizace. Antibiotika. Enzymy. 3) Plasty a sklo. Způsoby sterilizace, sušení. 4) Kultivační média. Používané půdy a k čemu slouží. Režim v laboratoři. Příklady přípravy média, vážení, rozplnění, sterilizace. Pokročilá média s přídavky antibiotik, séra, krve. Typy skla, způsoby uzavírání skla (GL, vatové zátky, alobal) s médii. 5) Očkování, režim sbírky kultur, matečné kultury, pracovní kultury. Kultury na misce, šikmém agaru, tekuté, jak a k čemu ty které používat. 6) Dekontaminace. 7) Lednice, komorová lednice, mrazáky, hlkubokomrazící boxy. Konzervace, co a kde uchovávat. Jak lednice udržovat v čistotě a pořádku. 8) Titrace bakterií a fága, ředění 9) Centrifugace, péče o centrifugy, bezpečnost, typy zkumavek, sterilizace dle typu plastu 10)Příprava fágového lyzátu, izolace fága z plaky, pomnožení do velkého objemu, triky a tipy jak pracovat s fágy. Shromáždení fágů centrifugací, zonální centrifugací, srážení PEGem, dialýza. Uchování fágů, kdy a proč filtrovat nebo používat chloroform. 11)Kolonkové kity, jaké jsou typy, jak s nimi pracovat, izolace DNA 12)Izolace plazmidu, měření na nanodropu. 13)Elektroforéza, typy agaróz, vaření gelu, režim v laboratoři 14)PCR, design, programování cyklerů. Práce s chemií, alikvoty, prevence kontaminace, režim v laboratoři. 15) měření absorbance na destičce pomocí přístroje Multifunkční modulární reader INFINITE 200 PRO, TECAN
Předmět je zařazen také v obdobích podzim 2024.