PřF:Bi8313 Prakt. z gen. inženýrství - Informace o předmětu

Bi8313 Praktikum z genového inženýrství

Rozsah

0/2/0. 2 kr. Ukončení: z.

Vyučující

prof. RNDr. Roman Pantůček, Ph.D. (cvičící)
doc. RNDr. Vladislava Růžičková, CSc. (cvičící)

Garance

prof. RNDr. Roman Pantůček, Ph.D.
Ústav experimentální biologie – Biologická sekce – Přírodovědecká fakulta
Kontaktní osoba: prof. RNDr. Roman Pantůček, Ph.D.

Předpoklady

! B6492 Prakt. z mol. biol. 2 && ( Ex_2979 Metody molekulární biologie || Ex_2980 Metody molekulární genetiky || B6390 Metody molekulární genetiky || B6400 Metody molekulární biologie || Bi6400 Metody molekulární biologie ) && ( Bi6405 Metody molek. biologie - cvič. || B6405 Metody molek. biologie - cvič. ) && NOW( Bi8090 Genové inženýrství )
Metody molekulární biologie, cvičení z metod molekulární biologie.

Omezení zápisu do předmětu

Předmět je určen pouze studentům mateřských oborů.

Předmět si smí zapsat nejvýše 24 stud.
Momentální stav registrace a zápisu: zapsáno: 0/24, pouze zareg.: 0/24
Jiné omezení: Studenti kteří již absolvovali B6492 tento předmět nezapisují z důvodu stejného obsahu. Prosíme striktně o dodržování limitu počtu studentů.

Mateřské obory/plány

• Molekulární biologie a genetika (program PřF, M-BI)
• Molekulární biologie a genetika (program PřF, N-BI)

Cíle předmětu

Cílem praktického kurzu je zvládnutí metod pro manipulaci s DNA (restrikční endonukleázy, klonování DNA, příprava molekulárních sond, polymerázová řetězová reakce a její modifikace)

Osnova

• Izolace restrikčních endonukleáz Sau3AI a Sau96. Klonování ve vektorech řady pUC. Defosforylace konců vektoru alkalickou fosfatázou, ligace vektorové a cizorodé DNA T4 DNA ligázou, transformace kompetentních buněk, identifikace rekombinantů na ampicilinových plotnách, restrikční analýza klonů. DNA hybridizace. Neradioaktivní značení DNA digoxigeninem (příprava genově specifické sondy), příprava roztoků pro hybridizaci, Southernův přenos DNA na hybridizační membránu, hybridizace DNA se značenou sondou, imunologická detekce. PCR (polymerázová řetězová reakce). Optimalizace primerů, identifikace genů pro koagulázu, TSST-1 toxin a rezistenci k meticilinu, RAPD-PCR. Sekvencování DNA. Příprava denaturačního polyakrylamidového gelu pro sekvencování, zpracování sekvencí DNA a proteinů na PC.

Literatura

• SAMBROOK, J., E.F. FRITSCH a T. MANIATIS. Molecular Cloning. A laboratory Manual. Second Edition. Cold Spring Harbor: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989. ISBN 0-87969-309-6. info

Metody hodnocení

Výuka probíhá blokově v období květen - červen. Předpokladem pro získání zápočtu je absolvování všech úloh.

Informace učitele

Návody k jednotlivým úlohám jsou dostupné u vyučujících

Další komentáře

Předmět je vyučován každoročně.
Výuka probíhá blokově.

• Statistika zápisu (jaro 2003, nejnovější)
  
• Permalink: https://is.muni.cz/predmet/sci/jaro2003/Bi8313